| APEC | 亚太经济合作体 |
| BP | 对虾杆状病毒 |
| CCP | 关键控制点 |
| CV | 变异系数 |
| EDTA | 乙烯二胺四乙酸 |
| FAO | 联合国粮食及农业组织 |
| HACCP | 危险分析关键控制点 |
| IHHN | 传染性皮下出血性坏死 |
| LAN | 局域网 |
| NACA | 亚太水产养殖中心网 |
| NC | 国家协调官 |
| OIE | 动物流行病国际署 |
| PCR | 聚合酶链式反应 |
| PL | 虾苗 |
| PVC | 聚氯乙烯 |
| SEMERNAP | 环境、天然资源和渔业部 |
| SOPs | 标准操作程序 |
| SPF | 无特定病原 |
| SPR | 抗特定病原 |
| SPT | 耐特定病原 |
| TSV | 托拉综合症病毒 |
| UV | 紫外 |
| WSSV | 白斑综合症病毒 |
| YHV | 黄头病毒 |
病害已经成为拉丁美洲对虾养殖的一个主要限制因素。尤其是自从白斑病(由白斑综合症病毒WSSV引起)爆发以来,许多国家的对虾产量出现了显著的下降,养殖户在继续生产方面遇到了严重的困难。由此产生的经济损失及其影响正在对国家经济和较贫困人群带来严重的影响。例如,厄瓜多尔1999年12月的对虾出口量下降到了1985年以下的水平。为与这种状况的斗争提供援助被认为是非常适当和迫切需要的。这种援助将有助于保证对虾养殖的发展、通过贸易(包括本地和国际的)带来的国家性收入和养殖户以及其他服务提供者的生计。
在调查对虾病害和病原扩散的特点时,尤其是那些病毒性病原,有令人信服的证据表明大多数重要疾病的爆发与活虾(繁殖亲体、无节幼体和虾苗(PL))的转运相关。在以水产养殖为目的的活虾群体的国际性或地区性转运中持慎重的态度是重要的。这种防范甚至适用于已驯化的群体和在不同地点养殖的同一对虾品种。但是,应当允许采取了适当的隔离和筛检程序的转运。
在过去的几年内,主要通过在亚洲和拉丁美洲取得的经验,我们对控制对虾病,特别是白斑病毒综合症的途径和选择的了解已经有了改善。与虾病问题斗争的最终解决方法是在非胁迫性条件下,使用营养全面的干饲料在生物安全的池塘中养殖有保证的、驯化的无特定病原的对虾群体。这应当是对虾养殖业的最终目标。
在胁迫方面,虽然不可能控制天气,但我们确实有能力控制许多变化因子,例如池塘负载力、饲料投入和水交换。目前,干饲料看来是适当的,尽管在其质量上显然还有改善的余地。养殖者目前面临的最大的潜在可控制问题是养殖中与虾苗质量方面的不确定性和缺乏避免病原和其携带者进入的池塘环境生物安全性。
解决虾苗质量问题最简单的方法是从使用来自捕捞亲体的虾苗转向使用来自驯化群体的虾苗。但是,这种实践要求相当的研究努力和野外试验,它仍处于其初期阶段。至少,我们能够试图通过放养之前针对重要的病原对虾苗进行筛选来保证池塘的生物安全性。针对重要病原(主要是WSSV)的虾苗筛选程序已为众所知,但是,更多的培训、能力建设和孵化场及诊断中心的提高是必要的。
目前,还缺乏协调一致的孵化场生产技术标准。建立这种技术标准,使其标准化、得到验证和在国家和国际范围内被孵化场生产者所接受是必要的。
1999年11月,在菲律宾的宿雾市举行了一个粮农组织专家研讨会,包括5个拉丁美洲国家在内的14个国家的代表出席了研讨会。研讨会对若干控制虾病问题的策略进行了讨论并达成了一致和对以后的活动做出了建议。这些想法在2000年7月24-28日在墨西哥哈利斯科Puerto Vallarta举行的关于水产动物病原的跨界转移和水产养殖健康管理统一标准的最近的APEC/NACA/粮农组织/SEMARNAP专家研讨会上进行了进一步讨论。所形成的一个共识是这些策略应当被结合到以援助为目的的地区性技术合作项目中,建议参与项目实施的粮农组织成员国在项目建议书的制定过程中表示出对这些策略的赞同。
制定活体水生动物(亲体、无节幼体和对虾苗)安全跨界运输所需的检疫和健康认证的地区性技术指南和标准,并且在该地区内使其一致化被认为是及时和适当的。但是,做到这一点需要一定的时间,而且在建立适当的国家性能力之前,如何遵守这些指南和标准还会是一个问题。尽管如此,粮农组织为亚洲水生动物安全转运制定的健康管理方面的技术指南经验可以适时地应用和有助于拉丁美洲的工作(见粮农组织/NACA 2000,2001a)。包括职员和养虾户在内国家性机构的能力建设是重要的。应当使养殖户们了解可用于控制病害(尤其是WSSV)的选择和机会。建立良好的养殖场和孵化场管理准则和以足够的科学证据和野外数据对其加以证明也是适当和及时的。
考虑到以上几点,非常清楚的是帮助美洲国家应对当前的对虾病害形势的最及时和有效的方法是i)为虾苗质量的改善制定干预性措施;ii)养殖者和适当的国家机构中的能力建设;和iii)在该地区内建立全面的信息网络。厄瓜多尔政府向粮农组织提出了为厄瓜多尔与严重的虾病问题斗争提供技术援助的正式要求,在与美洲的对虾生产国进行商讨和达成一致后,粮农组织决定准备一个针对上述问题的地区性技术合作项目。
于2001年开始的这一项目,包含了伯利兹、巴西、哥斯达黎加、哥伦比亚、古巴、厄瓜多尔、萨尔瓦多、危地马拉、洪都拉斯、墨西哥、尼加拉瓜、巴拿马、秘鲁和委内瑞拉等14个国家的参与。每个国家的代表回答了关于其国家对虾成熟和孵化场实践的调查问卷。该问卷涉及了生产的若干个方面,注意力集中于对虾的成熟和孵化场的类型、规模、品种、管理、采用的理化处理和消毒程序;健康管理;生产和质量评估方法;运输方法和遇到的问题。
本文件提供的技术指南是由参与本项目的国家协调官(NCs)和专家编写和以参与国政府提供的信息为基础的。
2000年,全球报告的水产养殖总产量为4571万吨(mmt),其产值为564.7亿美元。超过一半的总产量来自于有鳍鱼类(2307万吨或总产量的50.4%),其余依次为软体动物(1073万吨或23.5%),水生植物(1013万吨或22.2%),甲壳动物(165万吨或3.6%),两栖动物和爬行动物(10.0271万吨或0.22%)和其它水生无脊椎动物(36965吨或0.08%。2000年,虽然甲壳动物(主要由对虾组成的大类)在重量上仅占全球总产量的3.6%,但在产值上它们构成了全球水产养殖总产量的16.6%。
2000年,全球水产养殖产量的一半多(54.9%)来自于海洋或沿海咸淡水,与此相对照的是占45.1%的产量来自淡水养殖。2000年,尽管咸淡水按重量仅提供了全球水产养殖总产量的4.6%,但按产值咸淡水贡献了总产量的15.7%。咸淡水中养殖的主要品种为高价值的甲壳动物和有鳍鱼类(分别为50.5%和42.7%),而软体动物和水生植物主宰了海水养殖(分别为46.1%和44.0%)。
在过去的若干年内,海水对虾持续左右甲壳动物的养殖,2000年对虾产量达到1087111吨(全球甲壳动物养殖产量的66%),而产值达到6880068900美元(总产值的73.4%)。水产养殖目前仅提供了略多于四分之一(26.1%)的全球对虾上市量。主要的养殖品种为斑节对虾(Penaeus
monodon)、中国对虾(P.chinensis)和南美白对虾(P.(Litopenaeus)vannamei),这三个品种的产量占2000年全球对虾养殖产量的86%以上。
甲壳动物产量的增长继续显示出强劲的势头,重量较1999年增加了6.8%,增长速度略高于有鳍鱼类(6.7%)、软体动物(5.8%)和水生植物(6.1%)。虽然对虾产量的增长仍然显著,与在上世纪70年代(23%)和80年代(25%)观察到的两位数增长相比,过去10年内的增长速度已下降到较为适度的水平(平均5%)。
尽管拉丁美洲国家仍然是世界水产养殖总产量相对次要的贡献者(按重量占全球产量的1.9%,按产值占5.3%),在过去的30年内,这些国家的产量已经有了急剧的增长,水产养殖总产量按重量增加了714倍,从1970年的1221吨(全球总产量的0.03%)增加到2000年871874吨。水产养殖在该地区继续保持强劲的增长,1990-2000年期间保持了14.2%/年的相当快的增长,虽然这一增长率与前20年的快速增长(1970-1980年期间34.4%/年和1980-1990年期间23.3%/年)相比慢了许多。1970-2000年期间的总体增长为24.5%/年。
该地区2000年按重量排名前十位的品种包括大西洋鲑鱼(166897吨或19.1%)、南美白对虾(139264吨或16.0%)、虹鳟鱼(97479吨或11.2%)、银大麻哈鱼(93419吨或10.7%)、罗非鱼(85246吨或9.8%)、鲤鱼(62241吨或7.1%)、江
蓠海藻(33642吨或3.8%)、鲢鱼(30000吨或3.4%)、智利贻贝(Mytilus chilensis)(23477吨或2.7%)和秘鲁花斑扇贝(Argopectin
purpuratus)(21295吨或2.4%)(粮农组织 2003)。
2000年该地区排名前十位的生产国包括智利(425058吨或48.7%)、巴西(153558吨或17.6%)、厄瓜多尔(62011吨或7.1%)、哥伦比亚(61786吨或7.1%)、墨西哥(53802吨或6.2%)、古巴(52700吨或6.0%)、委内瑞拉(12830吨或1.5%)、哥斯达黎加(9708吨或1.1%)、洪都拉斯(8542吨或1.0%)和秘鲁(6812吨或0.8%)。
按产值,该地区水产养殖产量增加了8倍多,从1984年3.37亿美元增加到2000年的29.8亿美元(按产值计占全球水产养殖总产量的5.3%)。按产值计,主要品种大类为有鳍鱼类(18.9亿美元或63.4%)、甲壳动物(9.4亿美元或31.5%)和软体动物(1.28亿美元或4.3%),最重要的养殖品种为南美白对虾(8.48亿美元或28.4%)、大西洋鲑(5.67亿美元或19.0%)、银大麻哈鱼(3.46亿美元或11.6%)、虹
鳟鱼(2.91亿美元或9.7%)、罗非鱼(2.21亿美元或7.4%)、鲤鱼(1.76亿美元或5.9%)、秘鲁花斑扇贝(0.93亿美元或3.1%)、对虾(种类不明)(0.77亿美元或2.6%)、淡水白鲳(Colossoma)(0.75亿美元或2.5%)和鲢鱼(0.21亿美元或0.7%)。
拉丁美洲的对虾养殖业是作为该地区一个重要外汇来源出现和发展起来的。最初,对虾生产者几乎完全依赖于从那些自然存在于河口和沿海地区的野生虾苗(PL)的捕捞。然而,虾苗捕捞上的季节和年季变化导致了对虾孵化场的发展,在孵化场内,虾苗的生产能以更加有控制的方式进行。这些孵化场使用的是由渔民捕捞和提供给孵化场的野生繁殖群体。
由于埃尔尼诺现象导致的野生虾苗和繁殖亲体捕捞量的波动给孵化场的发展带来了重要的影响。在天然虾苗丰富的年份,较低的的价格和野生虾苗更加强壮的一般看法意味着许多孵化场面临了经济上的困难。另一方面,在野生虾苗缺乏的年份,孵化场生产的虾苗能够以额外高的价格出售。尽管如此,许多孵化场经历了由于销售前景不可预测带来的问题。
近年来,病害或更具体地说对对虾健康的关注带来了对在被认为相对于其它地区对托拉综合症病毒(TSV)不那么敏感的国家孵化场生产的对虾苗的兴趣的恢复,而且这导致了该地区对虾亲体、无节幼体和虾苗有利可图的跨界贸易。不幸的是,在上个世纪90年代后期降临到该地区的白斑综合症病毒(WSSV)使当地的孵化场经营者面临了如果他们不在适当的控制和管理下进行这种运输就有可能扩散这种病害的可能性。
与此同时,在开发对这一病毒具有更强抵抗力的对虾品系的努力中,一些生产者一直在利用TSV爆发后的幸存者进行繁殖的试验。WSSV的流行和纵向传播的危险加速了这种研究和导致了对遗传和育种更大的兴趣和公认对天然对虾资源的依赖象征着重大的病害风险。孵化场经营者评估了他们的运作,并聚焦于其生产系统生物安全性和健康管理的改善。
现在,拉丁美洲的大多数国家已经开始了在成熟系统中使用池塘培育的亲体进行驯化和遗传选择的项目。这种项目已经在试图稳定其对虾群体的可预测性、改善其对虾群体的疾病抵抗力和生长速度。在最初的尝试中使用了来自该地区不同国家的繁殖亲体以保证群体广泛的遗传变异性,但是后来大多数边界关闭了活虾的进口使得这种活动受到了限制。
该地区的大多数国家正集中于生产抗特定病原(SPR)或耐特定病原(SPT)对虾,从池塘养成设施中选择成活最佳(不一定是无病的)的个体和在转移到成熟系统之前,在不同的设施中进一步培育这些个体。无特定病原(SPF)对虾(比如,那些被确认不带有某种或更多病原的对虾,终生被养殖在封闭的系统中)也被不那么频繁地使用,如有使用,这些动物通常是从美国的隔离繁殖中心引进的。
孵化场必须是合理设计的和拥有足够的基本设施,因为这对于所生产虾苗的数量和质量有重要的影响。
孵化场的设计(或对于现有孵化场的改进)应当保证良好的生物安全性、高效、成本效率高和孵化场标准操作程序(SOPs)的实施。孵化场运作中 成功的生物安全性所需的设施方面的要求将在相关的标题下在本节通篇进行讨论。
对虾孵化场应当由几个单元组成,每个单元拥有适当的基本设施
设计良好的对虾孵化场应当由隔离检疫、适应环境、成熟、产卵和孵化、幼体和虾苗培育、室内和室外藻类培养和丰年虫孵化所需的相互分隔的设施组成。此外,还需要水处理(提水、蓄水、过滤、曝气、加热和分配输送所需的设施)和投饲(用于分析的实验室和加工及存储设施)辅助性设施,以及维护区域、无节幼体和虾苗包装区域、办公室、库房和员工生活住处。
良好的孵化场设计应当包括不同生产设施物理上的分离或隔离和有效的周边安全
不同生产设施的物理分离或隔离是良好孵化场设计的特征和应当被结合到新孵化场的建筑之中。在现有的缺少物理隔离的孵化场,也可以通过建造隔离物和实施生产过程和产品流动中的控制来实现有效的隔离。孵化场设施应当在所有物边界周围建有围墙或隔离栅栏,并具有足够的高度阻止动物和未经许可人员的进入。这将有助于降低通过这种途径引入病原的风险以及提高总体安全性。
为了把引进新的动物过程中感染现有繁殖群体的可能性最小化,应当有一个用于新繁殖群体的隔离检疫单元。
对所有将要被引入孵化场的新的动物的隔离检疫是一项基本的生物安全措施。在被输送到生产系统之前,必须对繁殖群体进行亚症状水平上的病原筛检(比如,通过点渍法、多聚合酶链式反应(PCR)和免疫斑法等)。被严重的不可治疗的病原感染的繁殖群体应当被立即销毁,而只有病原检测为阴性的动物可以被引入到成熟单元内。
水处理系统的设计应当能够提供高质量的源于海洋的海水
用于孵化场的水应当被过滤和处理以防止可能存在于水源中的病原携带者和任何病原的进入。这可以在进入最初的蓄水池或沉淀池前通过亚沙井点、沙滤器(重力或压力)或过滤网袋的初滤来完成。在沉淀之后,经过初级的氯化消毒,应该用细滤器再次对水进行过滤,然后用紫外光(UV)和/或臭氧进行消毒。使用活性碳滤器、添加乙烯二胺四乙酸(EDTA)和水温和盐度的调节也可以是供水系统的特点。
水分配系统的设计应当考虑水被分配到的各个区域所要求的生物安全牲的水平
孵化场系统的每个功能单元应当有适当的水处理和应当与其它区域(例如,隔离检疫区域)的水源相隔离(如果必要的话)。孵化场的局部或整体可以使用分开的再循环系统来减少水的使用和进一步促进生物安全性,特别是在高危险地区。
所有从设施中排出的水都应当不带有病原
所有从孵化场排出的水,特别是已知道或被怀疑受到感染(比如,来自隔离检疫区域的水)时,应当在被排放之前被暂时保留和用高氯酸或另一种有效的消毒剂进行处理。在水会被排放到与提水相同的地点时,这是特别关键的。
在成熟和幼体培育每个阶段采用的更加具体的水处理程序将在适当的章节中详细讨论。
必须达到良好的生物安全性,因为它对于成功地生产健康虾苗是最为重要的
生物安全性被定义为“...能够降低病原的引入和它随后从一个地点向另一个地点传播的可能性的一系列实践...”(Lotz 1997)。生物安全性程序的基本元素包括保护孵化场免于所有高危险疾病的后果所必需的物理、化学和生物方法。有效的生物安全性要求关注一定范围的因素,有些是与疾病具体相关的,有些则不是,其范围从单纯的技术因素到管理和经济等方面。依据孵化场的设施、所关注的疾病和感觉到的风险的级别,可以采用生物安全性所需的不同水平和策略。需要采用的生物安全性的适当水平在总体将是实施的容易程度和成本与疾病对生产运行的影响的函数(Fegan和Clifford 2001)。负责任的孵化场运营也必须考虑到疾病被引入到自然环境的潜在危险和它对相邻的水产养殖经营和自然动物群落的影响。
每个孵化场应当制定它自身的一套标准操作程序(SOPs)
概括孵化场控制规则的标准操作程序(SOPs)应当被以覆盖了生产周期的每一个阶段或过程的全面的文件所描述。该文件应当包括所有关键控制点(CCP)的详细情况和描述如何完成每一项任务来控制相关的危险。一旦适用于孵化场的规则形成了文件,SOPs要应当被提供给所有的人员,所有的工人都应当能在一个可以到达的地点(餐厅、会议室等)获得一份文件。应当举行一个会议来介绍这一
规定和解释SOPs的内容和必要性。这是一个清楚地发现和解释所有可能产生疑惑或被误解的问题和获得孵化场员工有用的投入的很好机会。
当新的信息成为可用时,对于SOPs的更新和改进将是必要的,而且任何的变动都必须通知到所有的人员。SOPs的任何更新版本应当有修改的日期
和新版本取代所有之前版本的明确声明。
所有的工人应当签署一份文件指出他们己经阅读和理解了SOPs,而且他们将遵守所有的要求
孵化场所有管理部门和员工工作的描述应当包括与遵守SOPs和疏于遵守后的纪律后果相关的条款。
关于生物安全性维护的培训应当是孵化场生产过程的一个重要组成部分
拥有一批受过较高水平培训或经验丰富、能够在SOPs每一步的执行过程中指导和培训工人的人员是明智的。这一点具有根本的重要性,因为工人们可能无法理解所要求的标准或不遵守这些要求给孵化场的成功带来的风险。这些技术人员必须通过组织与每个部门工人的会议来解释和讨论执行SOPs的重要性。
应当确定孵化场每个区域所带来的生物安全性风险
孵化场的不同区域可以根据疾病引入或转移的风险程度来分类。Weirich等(发表中)用以下系统来描述四个等级:
·所关注的病原可能存在或受到怀疑的隔离检疫区域,
·要求最低限度的暴露以避免潜在病原的引入或传播的高度敏感区域,
·病原引入或传播风险较低的中等敏感区域,和
·病原引入和传播的风险不太可能存在的低敏感区域。
如果需要的话,这些分类级别可以被修改和在SOPs的更新版本中显示出改变。具体的规定和限制可以应用于这些生物安全性级别的每一级,以防止病原的进入或传播。
危险分析关键控制点(HACCP)方法可以使生物安全性规定的制定和实施变得更加容易
HACCP方法是一种以危险分析为基础的预防性风险管理系统,而且在食品加工系统中被广泛使用以确定和控制对人类健康的风险。在必须采取控制以防止、消除或减少危险的系统,在关键控制点上确定了临界限度。然后采取监测和纠正性的行动(Weirich等,发表中)。HACCP原理已经被用作控制对虾研究和生产系统中病毒性病原的一种风险管理工具(Jahncke等,2001)。
HACCP也应当被应用于对虾生产,并以降低或防止病害危险为特别重点
通过繁殖、孵化和生产阶段的隔离可以实现对虾生产设施中最大限度的生物安全性(Jahncke等。2001,2002)。具有高度隔离的良好设计能够帮助减少病原从亲本向它们的后代传播的危险。为对虾生产中成熟和育苗阶段确定的关键控制点(CCP)为对虾、饲料和水。实施SOPs和HACCP中应当覆盖的其它潜在危险为病害携带者(人类和动物)、设施和设备。
应当为孵化场设施建立一个详细描述所有操作和对虾及幼体在整个生产系统中运动的流程图
对于从繁殖亲体的接收到成熟、幼体培育和育苗池的每个操作阶段(如果适用的话),所有潜在的危险、对幼体健康和质量的影响和病原的进入点都应当被确定。在这种系统的危险分析之后,CCPs应当得到确定。对于每个CCP,都必须确定临界限度,而且确定一旦这些限度被突破时的适当纠正措施。一个CCPs监测系统必须与良好的记录和文件资料系统一道被建立起来。
必须为每个区域确定关键控制点(CCPs)
有必要为诸如隔离检疫、成熟、孵化、藻类培养和丰年虫生产等不同的区域确定关键控制点。下列阶段可以被考虑为关键控制点,虽然它们可能不是唯一的、而且可能随着地点的不同而发展变化:
·设施的入口:在入口处对操作工、管理职员、交通工具和其它疾病携带者进行控制以防止来自其他孵化场和整个环境感染的传播。
·水处理:必须对生产单位内的所有用水进行适当(依据阶段)的处理(氯、臭氧、过滤等)来杀死病原和它们的寄主。
·成熟:隔离检疫引入的繁殖亲体;对鲜饲料进行检查和消毒;清洗水池和水气管道;对繁殖亲体、卵、无节幼体和设备进行消毒。
·孵化场:经常的干燥期;建筑物、水池、过虑器、水气管道和设备的清洁和消毒;鲜饲料的质量控制和消毒;每个房间、每个水池的工具的分离。
·藻类:限制人员进入藻类实验室和水池设施;设备、水及空气消毒;藻类和使用的化学药品的卫生和质量控制。
·丰年虫:卵的消毒、幼体消毒、水池和设备的清洗和卫生。
·限制对孵化场总体和各个区域的进入,尤其是获得允许的人员:所有进入生产区域的员工和管理人员都必须遵守SOPs规定的程序。
孵化场的工人必须被限制在他们特定的工作区域内
孵化场的工人必须被限制在他们特定的工作区域而不应该能够在不是指派给他们的区域随意走动。进行这方面管理的一种实用的方法是为各个区域提供不同颜色的制服。这将使得处在不应出现区域的人能够很快地被辨认出来。
SOPs应当解决由于职责要求他们通过孵化场内具有不同生物安全性分类级别的区域的人员导致的危险
例如,可以通过提供一个员工能够聚会讨论和计划工作进度表的中心区域、或通过用内部对讲系统、无线电、文本信息、移动电话或电脑系统的局域网进行交流,在限制人员在孵化场不同区域间移动的同时维持在不同区域工作的员工的通讯。
在进入和离开生产单元时,所有人员都必须采取适当的卫生防范措施
员工在生产区的时候必须穿橡胶的长统靴。生产单元(孵化、成熟、藻类培养、丰年虫等)必须只有一个入口/出口以避免不必要的穿过性通行。入口处必须有一个洗脚池,池内有最终浓度不低于50ppm的有效成分的次氯酸钙(或钠)溶液。在必要时应对消毒液进行更换。在进口门内,每个房间都必须有一个盛有20ppm的PVP-碘(聚乙烯吡咯烷酮碘剂)溶液或70%的酒精的碗,进入或离开房间的人员必须在这种溶液中洗手。
必须对交通工具(人员或对虾运输车辆)给予特别的关注,因为这些交通工具在到达之前可能到过其他的孵化场或对虾养殖场
所有的车辆都必须经过一个车轮洗涤池,其大小应当足以保证车轮的完全洗涤。车轮洗涤池必须经常地添加有效的消毒溶液(如大于100 ppm有效浓度的次氯酸钠(钙))。
潜在疾病携带者进入到孵化场内必须得到控制
某些对虾病毒发现于一定范围的陆生动物上,例如昆虫和鸟类(Lightner1996,Lightner等1997,Garza等1997)。虽然不可能控制所有潜在的疾病携带动物,使用物理屏障,如栅栏可以把它们的进入降低到最低限度,而网或或网状编织物可以用于排除鸟类和昆虫。通过确保没有从开放性水源的进入途径,尤其是通过进水管和排水渠,可以将水生动物排除在外。所有进入设施的水应当被过滤和消毒,只要可能,所有的排水渠道应当安装滤纱或加盖以防止野生水生动物的 进入和形成。
孵化场生产过程中必须负责任地使用化学药品
在孵化场生产过程中,化学药品(例如,消毒剂、药物、抗生素、激素等)有很多用途,它们能够提高生产效率和减少其它资源的浪费。它们常常是诸如水池建造、水质管理、繁殖亲体、幼体和虾苗运输、饲料配方、操纵和促进繁殖、促进生长、疾病治疗和总体健康管理的基本成分。
但是,化学药品必须以负责任的方式使用,因为它们可能对人类健康、其他水生和陆基生产系统和自然环境带来潜在的危险。这些危险包括:
·对于环境的危险,例如水产养殖化学制剂对水和沉积物质量(营养盐富集、承载有机物质等)、天然水生群落(毒性、对群落结构的干扰和对生物多样性的合成影响)的潜在影响和对微生物的影响(改变微生物群落)。
·对于人类健康的危险,例如,由于处理饲料添加剂、治疗药物、激素、
消毒剂和疫苗给水产养殖工人带来的危险;形成对人类药物中使用的抗生素具耐药性的病原品系的危险;和由于食用含有不能接受的高水平化学残留的水产养殖产品给消费者带来的危险。
·对于生产系统中其他家化品种的危险;例如由于形成具耐药性的细菌可能导致家畜或家禽的疾病。
因此,仅仅有资格和受过充分培训的孵化场人员被允许操作化学药品、在特定场合下使用的化学品是最适合于所应达到的目的和以正确的方式使用这些化学品(比如数量、持续时间和处理条件)是基本的。
在使用化学品之前,管理部门应总是考虑是否其他更加环境友善的措施会同样地有效。化学制剂的有效和安全的使用和保存应当是孵化场标准操作程序(SOPs)整体的组成部分。关于对虾养殖和其他水产养殖系统中化学制剂使用的详细回顾可以从Arthur等(2000)的文献中找到。
动物流行病国际署(世界动物健康组织-http://www.oie.int)在其水生动物诊断检测和疫苗手册中提供了对虾养殖中使用的各种化学药品和消毒剂可接受和建议的剂量(http://www.oie.int/eng/normes/fmanual/A
summry.htm)(OIE 2003)。
表1提供了本文中提到的化学药品的名称和它们如何在拉丁美洲南美白对虾孵化场生产中被使用的概要。该表中提供的某些剂量(浓度和暴露时间)与2003年OIE提供的剂量略有不同。参加本文编写的专家公认表1提供的剂量在拉丁美洲的南美白对虾孵化场生产中更为有效。
表1.本文中提到的化学制品及其使用概要
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孵化场的用途 |
化学药品 |
建议浓度(有效成分的份额) |
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流入海水的消毒 |
次氯酸钠[2] |
20 ppm、不少于30分钟(或10 ppm不少于30分钟) |
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用于流入海水中重金属 的螯合作用 |
乙二胺四乙酸 |
依据海水中重金属的浓度 |
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排放海水的消毒 |
次氯酸钠 |
20 ppm、不少于60分钟 |
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确定水中氯的存在 |
正甲苯胺 |
5毫升水样中加入3滴[3] |
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水处理中氯的中和 |
硫代硫酸钠 |
每1ppm残留氯用1 ppm |
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繁殖亲体池水和孵化池水中 重金属的螯合作用 |
乙二胺四乙酸 |
必须根据场所内重金属的负载来确定,上限为20ppm,或二者均为 20-40 ppm |
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在繁殖亲体进入隔离检疫 时的消毒 |
聚乙烯吡咯烷酮碘剂福尔马林 |
20 ppm 50-100 ppm |
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繁殖亲体产卵后的消毒 |
聚乙烯吡咯烷酮碘剂 |
20ppm(浸泡)15秒钟 |
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虾卵的洗涤和消毒 |
聚乙烯吡咯烷酮碘剂或福尔马林和氟乐灵 |
50-100 ppm 浸泡1-3分钟(或10-60秒) 100 ppm浸泡30秒 0.05-0.1 ppm(减少真菌感染) |
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丢弃的幼体的处理 |
次氯酸钠 |
20 ppm |
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清除寄生在虾苗体表的污物 |
福尔马林 |
充分曝气条件下,20-30 ppm浸泡小时 |
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虾苗的应激试验 |
福尔马林[4] |
30分钟 |
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丰年虫卵的去膜 |
烧碱(NaOH)和氯溶液[5] |
4毫升中40克(8-10%的活性成分) |
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丰年虫幼体的消毒 |
次氯酸钠溶液或T-氯胺或两者兼用 |
20 ppm 60 ppm浸泡3分钟 |
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产卵和孵化池池水处理 |
氯乐灵 |
0.05-0.1 ppm |
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足浴 |
次氯酸钠(钙)溶液 |
>50 ppm(或>100 ppm) |
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设备消毒(容器、水管、网具等) |
次氯酸钠或盐酸 |
20 ppm(或30 ppm) 10%溶液 |
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手消毒 |
聚乙烯吡咯烷酮碘剂或、 酒精 |
20 ppm 70% |
|
用于繁殖亲体的产卵、虾卵孵化、幼体和虾苗的培育和丰年虫卵孵化的水池的清洗和消毒 |
次氯酸钠和/或盐酸[6] |
30 ppm(或20-30 ppm) 10%溶液(pH 2-3) |
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新生产周期开始前,对前期清洗和消毒过的水池进行消毒 |
盐酸 |
10%溶液
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藻类培养池的消毒 |
次氯酸钠随后用盐酸 |
10 ppm 10%溶液 |
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沙滤器的消毒 |
次氯酸钠或盐酸 |
20 ppm 10%溶液(pH 2-3) |
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筒式过滤器的消毒 |
次氯酸钠或盐酸 |
10 ppm 10%溶液(pH 2-3)浸泡1小时 |
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饲料准备设备(刀具、工作台、搅拌器、颗粒机等)的洗涤 |
聚乙烯吡咯烷酮碘剂 |
20 ppm |
经常性的健康评价应当是良好的孵化场管理的组成部分
根据亚洲在以往水生动物健康管理活动中所取得的经验,以下描述的用于对虾孵化场的健康评价技术被划分为三类(级别)。该系统被建立起来用于诊断水生动物疾病所需的诊断能力的衡量,因此,对虾孵化场常用的技术可以被划分为类似的三大类。不同层次的评价技术的详细情况由粮农组织/NACA(2000,2001a,2001b)提供。根据所使用技术的复杂程度,粮农组织/NACA提供了一个简单而方便的区分方法(表2)。
表2.适用于对虾孵化场系统的诊断级别描述
| 一级 | 对于动物和环境的观察。根据粗略的特征进行检查。 |
| 二级 | 使用光学显微镜和压片标本进行更详细的检查,可以采用或不采用染色和基本细菌学方法。 |
| 三级 | 采用更加复杂的方法,例如分子生物学技术和免疫诊断方法(如PCR和点渍法等)。 |
一级健康评价技术
一级评价技术在大多数孵化场普遍采用。大量幼体的详细检查是不实际的,孵化场经营者和技术人员经常使用一级诊断技术来获得对幼体健康状况的初步感觉和确定更详细检查的重点。一级观察对于作出一个孵化池或一批幼体的前景的判断常常是足够的。
例如,幼体的选择通常包括以趋光反应为基础的决定,而不需要更加详细的显微检查。如果一批幼体表现出很差的趋光性和很弱的游泳能力,它们将在无需进一步检查的情况下被拒绝。
二级健康评价技术
二级评价技术在对虾孵化场管理的决策过程中也被频繁地采用。大多数(即便不是所有的)孵化场会拥有显微镜以用于对虾幼体状况更详细的检查和观察各种与健康相关的直接特征(清洁、摄食行为和消化等)。
许多孵化场还经常性地采用基本的细菌学方法来获得对水池中细菌群落的了解和在幼体变得虚弱或生病时确定可能的病原。然后,这种信息可以被用于决定是否应当将该池的幼体抛弃或对其进行治疗。
三级健康评价技术
三级评价技术在对虾孵化场的使用正变得更加普遍。聚合酶链式反应(PCR)方法被用于针对病毒病的虾苗和繁殖亲体的筛检,点渍法和其他免疫诊断检验也
被用于相同的目的。不同的诊断技术在对虾孵化场的各种应用见表3。
表3.对虾孵化场内一级、二级、三级诊断技术的使用
| 一级 | 检查繁殖亲体的总体健康状况,性别确定,确定性别发育的阶段,确定蜕皮的阶段,清除生病和垂死的个体。 |
| 通过趋光反应选择幼体,根据对粪便条、幼体活动、虾苗的活动和行为的观察来确定蚤状幼体/康虾幼体的投饲,应激试验。 | |
| 二级 | 通过显微镜检查虾卵的质量。正常或垂死动物的细菌群落的检测。 |
| 无节幼体质量的显微检查。幼体状况的虾苗质量的常规显微检查。检查育苗水体和幼体的细菌群落。 | |
| 三级 | 采用点渍法或PCR对繁殖亲体进行筛检。 |
| 采用点渍法或PCR对幼体或虾苗进行筛检。 |
为了便于参照,对虾孵化场如何进行健康管理和维护生物安全性的技术指南是根据孵化场的基本生产过程—从繁殖亲体的选择到虾苗从育苗设施向外的运输来排列的。这一过程被划分为两大部分:产卵前过程和产卵后过程。产卵前过程包括繁殖亲体的选择、保持、成熟、环境适应、产卵和孵化步骤。由于这些步骤需要不同的设施 ,设施维护的指南是按照孵化场生产过程中使用的不同具体设施进行描述的。还对繁殖亲体的处置、营养和投饲进行了讨论。
为了成功地完成孵化场的生产,必须选择不带有严重病原的健康繁殖亲体
人们相信某些病毒病,如传染性皮下出血性坏疽(IHHN)会纵向地从亲本传递到后代(Motte等.2003)。这种纵向传播的疾病可以通过在孵化场生产系统中使用来自适当的无特定病原(SPF)程序(见下文)的不带有这些病原的家化对虾加以避免。
如果无已知病毒的SPF(或“高度健康”)对虾无法获得,应当通过适当的诊断试验来检测繁殖亲体的感染情况,而且所有被感染的个体均应被销毁。在疾病或病原检测中显示阴性的对虾仍应被看成是一种危险和应被放置在隔离设施中,直至完全了解其健康状况。
即使繁殖亲体从隔离设施中转移出来之后,某些孵化场通过每月对生产的虾苗进行监测来保持经常性的健康检查。群体中的一部分(比如0.1%)被取样进行PCR和血淋巴检测,并根据检测的结果采取适当的措施。取样动物的数量应当根据考虑了寄主群体大小和假想病原的流行情况的取样表确定(见例如,OIE 2003)。
如果可能的话,选作繁殖亲体的动物应当来源于封闭的操作过程,因为这允许我们对它们表现的历史和健康状况的掌握。理想地,它们应当来源于分布于与虾苗将被放养地区的理化特点(盐度、温度等)相似地区的孵化场。繁殖亲体选择采用的标准取决于繁殖亲体的来源(天然的或家化的)。
野生繁殖亲体:因为天然繁殖亲体的表现和生长记录无法获得和不可能有群体的改良,因此,目前有远离获取和使用天然繁殖亲体的趋势。由于人们相信野生来源的繁殖亲体能生产更多和更强壮的幼体,它们过去曾经为孵化场所青睐。但是近年来,与野生繁殖亲体一道引入病毒性病原的高风险已经改变了人们的这种偏爱。此外,越来越多的人认为有必要开发家化的对虾群体使促进对虾成熟和改善在孵化池和池塘中的表现成为可能,这导致了向使用控制条件下培育的繁殖亲体转变的趋势。就南美白对虾而言,使用小船网具捕捞的野生繁殖亲体更受欢迎,因为那些由拖网船捕获的对虾所受的损伤更大。用于成熟设施中的野生雌性个体体重应当超60克和具有已经发育的卵巢,而雄性个体的体重大致应当在40-50克。
家化的繁殖亲体:在过去的10年内,家化的对虾群体已经变得更加常见,南美白对虾和细角对虾的家化群体现在可以商业化获得。封闭过程生产的群体提供的规格通常小于野生个体,雄性个体大致在30克,而雌性个体不小于30-35克,而通常不足40克。所提供的雌性个体通常处于不抱卵状态。家化群体来自于几种来源之一。一些国家已经很好地建立了家化程序,而其他国家则依赖于进口的群体。家化的群体可能或者是通过专门的遗传改良程序进行所需性状的选育获得的,或者是简单地从不带或者猜想对特定病原具抵抗力或忍耐力的群体选育获得的。
已经建立了几种专门类型的家化繁殖亲体以降低疾病的危险。无特定病原(SPF)群体通常被保养在具有高度安全性的设施中,其后代(被指定为“高度健康”而非SPF)被提供给生产部门。抗特定病原(SPR)对虾是那些不易被一种或多种特定病原感染的群体,而耐特定病原(SPT)对虾是那些有目的地培育的对由一种或几种特定病原引起的疾病有抵抗力的群体。例如,对IHHNV具有抵抗力的细角对虾品系已经可以获得。
在使用家化对虾时,获得足够的关于群体的来源和它们以往表现的背景资料是必需的
为了避免由于近亲繁殖引起的潜在遗传问题和相关的生长不良和低成活率,必须获得家化群体的不同家系或起源的详细资料,无论它们起源于国外或本国。
拥有候选家系或品系在一定范围环境条件下的表现和发育的数据也是有益的。所采用的选育程序也是重要的,也就是无论该群体是从表现较好的池塘中选育的、还是在一次疾病暴发后从成活个体中选育的,以及选育程序的确切时间安排。用于表型特征选择(首次选择在达到捕捞规格,当雌性个体大于30克和雄性个体大于25克时和之后进行)的一些标准为:相对大小和总的体格外观、没有坏疽或其它(临床或亚临床)病症或肌肉和外骨骼的不健康、清洁的腹肢、无畸形的额角和半透明的虾体。
在到达孵化场之时,潜在的繁殖亲体应当被控制在隔离状态直至它们的疾病状况被确定
隔离检疫设施基本上是一个封闭的保持区域,在这里对虾被保留在单个的水池里直至掌握了针对病毒(在适当的时候,也针对细菌)的筛检的结果。
繁殖亲体的隔离单元应当在实体上与孵化场的其它设施相隔离。如果这不可能,应当对孵化场的设计进行改变,这样,不存在从隔离或控制区域污染到其它生产区域的可能性。应当对废物的处置和流出物的处理给予特别的关注。不应允许在这一区域工作的员工进入其他生产部分,而且他们应当一直遵守卫生方面的规定。
隔离检疫单元应当具有以下特点:
·它应当与所有培育和生产区域充分地隔离以避免可能的交叉感染。
·它应当处于一个四周被围绕和有顶的建筑内,与外界无直接的通道。
·应当提供在单元入口和出口处使用的足(容纳大于50 ppm活性成分的次氯酸盐溶液的足浴盆)和手(容纳聚乙烯吡咯烷酮碘剂(20 ppm和/或70%酒精的瓶子)消毒的方法。
·隔离区的进入应当仅限于指定专门在该区域工作的人员。
·隔离单元的员工应当通过一个更衣间进入,在更衣间脱去他们的街头服装,在进入另一个房间穿上工作服和胶靴之前进行淋浴。在工作轮班结束时,这一顺序被反向进行。
·在隔离间应当有足够数量的塑料桶和/或类似的容器以方便高效地每天经常地将对虾搬运进出设施。
·隔离设施应当有独立的、具有单独处理和消毒系统的水和空气供应和一个处理排出物以防止病原进入环境可能性的系统。
·设施中使用的海水必须进入一个蓄水池,在用硫代硫酸钠(每1 ppm氯残留用1 ppm)去除氯活性和强烈曝气之前,在蓄水池中用次氯酸盐溶液 (20 ppm活性成分,不少于30分钟)对海水进行处理。
·必须将所有的废水收集到一个水池中进行氯处理(20 ppm,不少于60分钟)和在排放到环境中之前进行去氯。
·所有死亡或感染的动物必须被焚烧或以其它被认可的方法处理。
·使用过的塑料容器和软管在再次使用前必须用次氯酸盐溶液洗涤和消毒。
·所有在隔离单元内使用的工具必须清楚标记和应当保留在隔离区域。应当有在每天结束时消毒所有设备的设施。
隔离检疫单元的结构应当使对虾在健康状况变得清楚时从“肮脏”区域被搬运到“清洁”区域。
根据是否容纳尚未通过感染筛检(检前)的对虾或已经通过筛检(检后)的对虾,隔离区域的各个部分应当被指定为“肮脏”或“清洁”。对虾只能按一个方向搬运,从隔离设施的肮脏部分搬运到清洁部分,而且所有的搬运都应得到控制,以确保不会发生两个区域间的混杂。
在进入隔离区域时,繁殖亲体要通过聚乙烯吡咯烷酮碘剂溶液(20 ppm)或福尔马林[7](50-100 ppm)的浸泡。在隔离的第三天,从每只对虾(如果单个暂养)或群体的一个样本(如果以一群暂养)取下一个腹肢用于分析。如果对虾被集体暂养,应当从每一个水池中进行随机取样来评价养殖在该容器内群体的总体状况。一批十只腹肢可作为一个样本进行分析。显示阳性结果的任何批次可以被放弃或,如果为动物被单个暂养时的集中样本,随后可以在单个水平上对对虾进行检测以确定和仅放弃阳性个体。感染的动物应当用焚烧的方式或其它能够防止病毒可能扩散的方法处置。
隔离设施的建造和运行的更多的详情可以从MAF(2001)、Anon.(2002)和AQIS(2003)中找到。
在明确了解繁殖亲体的健康状况之前,它们不应被从隔离设施中释放出来
隔离检疫周期将随着完成健康检查程序所需的时间而变化。在任何情况下,动物应当在观察中被暂养在隔离设施中,直至完成所有的检测,而且在被转移到环境适应区域之前至少要被隔离20天。根据设施的设计和隔离检疫单元相对于环境适应区域的位置,这可能包括繁殖亲体的重新包装以运送到较远的地点或用装有适应设施用水的消毒桶将它们运送到同一设施中的不同部分。
在任何一种情形下,用于转运的设备应当与用于隔离间的设备分开保存和在转运之前和之后进行消毒。所有用于隔离区域的设备应当保留在隔离
区域和在每天结束时在指定专门用于消毒目的的水池中消毒。
必须根据孵化场的具体需要来确定实验室设施和相关的专业技术人员
需要有基本的实验室设施(例如显微镜,一些微生物学能力等)来开展常规的对虾健康检查。额外的更加复杂的设施,例如开展PCR检测的设施,需要建立更加专一的设施以避免污染的可能。这些设施的设计和运行超出了本文件的范围。
通过了最初的隔离检测的对虾必须在成熟设施内适应新的环境
适应环境的过程会持续7天到几个星期。在此过程中,繁殖亲体将使自己适应于成熟设施的环境条件和提供它们的饲料种类。在配合饲料被用于补充天然饵料,这是尤其重要的。
环境适应设施必须有足够的水池空间来容纳将要被引入成熟设施的对虾
这样的设施还能给予成熟系统最优化的生产。这是因为良好适应的对虾一旦被引入成熟系统,应当已经准备好开始生产幼体,而不会失去过分长的“间歇时间”(雌虾被引入成熟系统与第一次产卵之间的天数)。
在被放养到成熟池之前,繁殖亲体应当度过至少7天(和可长达数周)的适应期
在此期间,隔离区域与成熟设施之间任何温度和/或盐度上的差别应当是逐渐转变的。投饲的方式也应当逐步调整使对虾能够习惯在成熟设施中采用的方式。还要观察脱皮的进程,在合适的时候,只应对两次脱皮之间的雌性个体进行眼柄切除。通过这种方法,即将被转移到成熟单元的雌性个体已经被切除了眼柄,因而已经准备好几乎可直接生产幼体。
虾苗生产的第一步是成熟对虾的成熟和繁殖。采取的原则在一定程度上决定于孵化场的经营是控制下的育种项目的一部分,还是主要打算为商业化池塘养殖生产虾苗。
根据这种差别,成熟系统将设计为或者使为商业化虾苗生产服务的幼体产量最大化,或者为对交配和遗传杂交的最大控制提供可能。虽然在传统的成熟单元内有可能控制交配过程,对于单个亲本的良好控制要求单性养殖和人工授精
,和为每批相对幼体数量较少的多批次生产设计的幼体培育和育苗系统。这带来了与典型的商业化孵化场或育苗系统非常不同的运行方面的挑战(Jahncke等2002)。
处置繁殖亲体的适当设施包括隔离设施、环境适应设施和带有适当的辅助系统的主要生产(成熟、产卵和孵化)设施。
成熟建筑物必须足够大,以容纳足够的成熟池和孵化场所需的辅助设施
在设施设计中考虑的因素包括所要求的幼体生产水平、所采用的繁殖亲体的放养密度和性别比例、估计的雌性亲体产卵率、估计的单个雌性亲体提供的卵和幼体的数量和采用的生产系统(批次或连续型)。
必须对成熟间的条件采取严密的控制
成熟间应当保持较低的光照,最好带有控制光照周期的系统。光照周期应当维持在大约10-12小时黑暗和12-14小时明亮,两个周期之间的光照水平应当在1-2个小时期间逐渐转变。应当对进人成熟间给予限制,噪声(尤其是喧闹或间歇性的噪声)、活动和其他干扰应当被保持在最低限度。
最好的话,成熟间应当具有颜色为黑色、内缘光滑和直径大约为5米的圆形水池。繁殖亲体应当被保持在流水之中(新鲜或再循环水),每天总的水交换量为250-300%和保持连续的、但不是太剧烈的空气供应。水深通常大致为0.5-0.7米。对虾的放养密度大致为每平方米池底面积6-8只对虾,雄雌个体比例为1-1.5:1。因而,一个直径为5米的池子可以容纳6O-80只雌虾和60-100只雄虾。水温通常控制和保持在28-29℃的范围内,盐度为30-35
ppt,pH为8.0-8.2。
饲料准备区域应当与成熟间相邻;但与成熟反隔开
成熟间应当备有各种加工工具(刀具、勺子、碗/桶、切板、搅拌器和颗粒机等)和用于储存食品的一个冷藏柜和一个冷冻柜。
成熟池必须每天虹吸和定期清洗
由于采取的高投饲率,需要每天把水池中未吃掉的食物、粪便和脱皮虹吸清除。虹吸管由两部分组成,一根PVC管和一根软管。每个成熟池应当有自己的PVC管,但所有的池子可共用一根软管。在虹吸每一个池子之前,应当用清洁处理过的水洗涤软管。从池中虹吸出的残骸和废物可以通过安装在软管端头的网袋收集和在清洁操作结束后焚烧。在工作日结束时,应当对软管进行洗涤和把它浸没在装有次氯酸钙溶液(20
ppm)池中。
如果水池中存在过多的积聚藻类或包括污着性原生生物在内的沉积性生物,还必须对池壁、池底进行间歇性的洗刷。这通常可以通过降低池水水位而无需移走繁殖亲虾来完成,但有时也需把繁殖亲体转移到新池中。对于这样的过程,保留至少一个空池是一个很好的想法,这样可以经常性地开展这一工作。这样的清洁程序必须特别小心,使对繁殖亲体操作尽可能地少,因为对成熟繁殖亲虾过多的骚扰会干扰它们的产卵节奏
。
在检查每个水池前,必须对用于捕捞成熟雌虾的设备进行洗涤
用于捕捞成熟雌虾的抄网应当被保存在含有聚乙烯吡咯烷酮碘剂溶液和/或次氯酸盐溶液(20 ppm的活性成分)的容器中。
在自然交配中,应当保持最佳的群体密度
适合于南美白对虾自然交配的推荐群体密度大致为6-8只雌虾/m2。如果进行人工授精,放养的数量可以增加到16只虾/m2。在使用饲料情况下不会引起水质恶化的前提下,考虑水池所能容纳对虾按重量计的生物量,而不是仅考虑每平方米繁殖亲虾的只数也是同样重要的。建议的单位面积生物量为0.2-0.3kg/m2。
应当采用最适的雄雌放养比例
大多数系统会同时放养雌虾和雄虾,通常的雄雌比例为1:1-1.5。有时,不同性别个体被分开养殖。这会带来一些益处,包括减少雄虾池的投饲成本,因为可以使用较便宜的饲料(主要是鱿鱼和强化的人工饲料)培育雄虾,在可能的情况下通过维持雄虾较低的温度(25-27℃)来提高精液的质量,提高雄虾的放养密度和为人工授精技术的应用提供便利。
但是,分开放养雄虾和雌虾要求在每个产卵夜间捕捞和搬运雌虾两次(一次转移到雄虾池中,第二次转移到产卵池中),这会导致雌虾在一个脆弱阶段过度的应激反应。此外,混合性别放养中的交配往往是较好的,因为在混合放养池中对虾受到高水平激素的刺激。作为参照,野生繁殖
亲体每晚通常提供雌虾4-8%的产卵率,而家化的群体往往更加多产,每晚提供雌虾10-15%或更高的产卵率。
应当使用隔开的产卵间
产卵应当在与成熟区域隔开的场所进行,以保持产卵区域的清洁和能够在不干扰繁殖亲体的情况下开展日常的水池清洗和消毒。产卵间应当具有幼体生产水平所要求的足够和适当的设施。
只要可能,产卵应当单个地进行
这将减少疾病在雌虾之间横向传播的危险。已经表明产卵过程中排出的组织和粪便可能含有较高水平的某些病毒(IHHNV、HPV、BP、MBV等),而暴露在这些物质中,可能会导致集中产卵过程中健康雌虾的感染。如果必须进行集中产卵,每池中雌虾的数量应当尽可能少,以限制暴露在可能的感染中的雌虾数量(比如每200-300升水放一只雌虾)。
根据采用的产卵类型(单个或集中);产卵池的大小可以在300升至5-8吨的范围内变化
产卵池可以是平底的,但如果池底有一点锥形,或至少向出水口倾斜,可以使得虾卵的收获更加容易和少受损伤。虾池应当允许对被收集后的虾卵进行清洗和使用福尔马林(100 ppm,30秒钟)或聚乙烯吡咯烷酮碘剂(50-100 ppm,1-3分钟)的消毒。还可以0.05-0.1 ppm的浓度添加氟乐灵以防止真菌感染。这种消毒将有助于减少疾病传播的危险。
产卵系统应当拥有尽可能好的水质
应当对产卵和孵化池的用水采取水净化步骤。代表性的步骤包括紫外光处理、通过活性碳和直至<1 μm的筒式过滤。水质最好应当维持在28-29℃的水温和30-35 ppt的盐度条件下,与成熟池相同。常常要根据当地重金属含量推算的剂量向产卵池水中添加乙二胺四乙酸,作为鳌合剂。
作为一条普遍原则,应当只在必要的时候搬运繁殖亲体,以避免对虾过度的应激反应
应当避免过多地追赶单个对虾。在把握繁殖亲体时,在腹部弯曲的状态下牢牢抓住对虾,这样腹足和尾节缩拢在步足之间,使对虾折曲和跌落的危险最小化。避免过长时间地将繁殖亲体保持在离水的状态下。例如,在将雌虾转移到产卵池内时,应当按要求的方法把握雌虾,同时将它们保持在装有成熟池池水的大口杯或水桶中。
抱卵雌虾的收集应当在黄昏或傍晚进行
抱卵雌虾的选择应当在黄昏或傍晚进行(夜色刚降临时),或在所采用的光照周期规定的最适时间进行。在选择抱卵虾时,使用一个光线强、最好是防水的手电筒来检查成熟池哪些雌虾看上去已经抱卵(具有发育最好或第IV卵巢)。在发现抱卵雌虾时,使用抄网尽可能小心地捕获它和把它移到池边。然后检查雌虾和观察在其体外纳精器上是否有一个精襄。如果发现有精襄,则将雌虾放入容器内和转移到产卵场所。如果没有精襄,则将雌虾放入另一个容器和移到别处,在转移到产卵池前进
行人工授精(如果采用的话)。
应当对怀卵量、产卵率(每只雌虾产卵的数量)和雌虾保持在成熟池的时间进行监测
为了防止幼体质量的恶化,根据采用的投饲形式和产卵虾的健康状况,去除眼柄的雌虾通常应当最迟在三个月或15次产卵后从成熟单元内取出。未去除眼柄雌虾的产卵期可长达一年。这通常要求雌虾被以标记或其他方法单个地鉴别。
应当进行虾卵和精子的计数以确定优质卵的产量和受精
应当采用适当的虾卵收集系统
应当对受精和孵化率进行监测
孵化应当在隔离和清洁的场所进行
除了普通的健康筛检外,应当针对WSSV,IHHN,TSV和YHV对被选择用于成熟培育的繁殖亲体进行筛检
优质的饲料和良好的投饲方式应当是成熟程序的基本组成
必须避免饲料准备过程中的交叉感染
鲜饲料应当确实新鲜和被证实不带有重要的病毒或进行过消毒
新鲜饲料应当被切成适合于摄取的大小:
应当对人工饲料增添营养添加剂
干饲料应当与新鲜饲料分开投喂,每次采用较低的投饲率,每天投饲2-3次(每天最多为对虾生物量的2-3%),以保证饲料被完全吃掉
家化的南美白对虾比它们的野生个体或斑节对虾有优势,因为它们是用颗粒饲料培育的,因而更加习惯于颗粒饲料。事实证明,野生繁殖亲虾往往不情愿摄食干饲料,必须要在一定的时期内使其逐渐地适应于干饲料。就繁殖亲虾所有的管理实践而言,应当尽可能减少所作的改变,以限制动物的应激反应。对于投饲形式、饲料种类、数量和时间的任何变化应当被尽可能地减少。因此,应当一直保持所有饲料成分的原料或使用种类的稳定。
应当对所有的设备进行经常性地彻底清洗,每次使用后进行清洗和消毒和在新的生产周期再次开始之前进行清洗和消毒
孵化场设施应当允许对进水的适当清洁和消毒
理想地,成熟池和幼体培育设施应当被建造在海水供应比较有利的位置
应当使用“低沙滩井”进行初级水过滤
带有大量沉淀的海水应当通过沉淀池以除去悬浮固体物质
应当对进水消毒以消灭所有残留的病原和通过螯合作用去除存在的任何重金属
应当在水进入生产单元之前进行水温的调节
必须对沙滤器进行适当的维护
筒式过滤器必须每天调换
表4.为孵化场不同需要推荐的水过滤标准和不温
|
水用途 |
过滤规格 (μm) |
温度(℃) |
|
成熟 |
28-29 |
|
|
孵化 |
5 |
28-32 |
|
产卵和孵化 |
0.5-1.0 |
29-32 |
|
藻类培养(室内/纯种) |
0.5 |
18-24 |
如果使用再循环系统,应当使用额外的生物过滤
产卵池、孵化池和纯藻培养设施的用水必须具有相同的质量
应当用通过光线吸引它们到水面的方法来收获幼体
应当对幼体的活力和颜色进行评估和估计畸形的百分率
必须将被收获的幼体暂养在最佳条件下直至被放养
幼体培育应当尽可能地生产优质和高度健康的虾苗
应当对进入幼体培育区域给予限制
每个车间都应当有常规操作所需的完备的器具
所有的器具和设备应当只用于自车间,不应离开该车间或用于其他地方
应当定期地检查幼体和虾苗的质量
幼体培育设施应当包含一个或更多的锥形式V形幼体培育池
应当保持饲料准备中的高标准
藻类和丰年虫的培育场所的进入应当仅限于获得批准的人员
必须在微藻的培养过程中维持极高的卫生标准
应当使用适当的卫生标准和微生物学程序来维持藻类的纯种培养
在每次收获之后,必须对所有的藻类培养池进行冲洗和消毒
应当采取措施以保证丰年虫不会造成引入疾病的危险
应当对丰年虫脱膜
丰年虫应当在稳定的光照和充足的曝气条件下、以1-2 kg卵/吨海水的密度被孵化24小时或直至完全孵化
收获丰年虫后,应当对孵化池进行彻底的清洗
尽管人工饲料一般不会带来疾病的危险,必须恰当地使用和储存它们
如果要生产大量优质的幼体,必须保持对孵化场幼体健康管理所涉及的诸多因素的严格控制
表5.一些影响对虾幼体健康的因子和可能的控制方法
|
因子 |
影响 |
控制方法 |
标准 |
|
放养密度过高 |
应激反应 自残 水质差 |
降低放养密度 |
100-250只/升 |
|
水质差 ◆海水(A) ◆池水(B) |
死亡率 晚脱皮 畸型 |
通过过滤、氯处理 和/或消毒改善水质(A) 增加水交换(B) |
滤器<5μm 活性碳 氯处理(10ppm)后进 行中和 臭氧和紫外光 每天20-100%的水交换 |
|
放养时间过长 |
增加了后期放养幼 体的感染率 |
限制育苗池放养过程的天数 |
每单元3-4天 |
|
投饲差 (质量和/或频率) |
自残 营养不良 体表寄生物污着 水质差 |
适当的投饲方案 经常地检查饲料消 耗和水质情况 |
使用优质饲料,每2-4小时投喂一次直至吃饱 |
|
藻类的质量和/或数量 |
蚤状幼体阶段的死亡率 幼体的污着 |
定期的计数和质量检查 |
角刺藻或海链藻800000-130000细胞/毫升 |
|
丰年虫幼体 |
细菌的来源,引起死亡 |
丰年虫幼体消毒 |
20 ppm活性成分的次氯酸盐 |
幼体的放养密度不应过高
必须维持良好的水质
应当小心地掌握水交换
还应当考虑在孵化场使用生物保护剂和细菌酶
孵化场内幼体培育池的每一个独立单元,或更好地,整个孵化场的幼体放养应当在尽可能短的时期内完成
应当密切监控投饲的数量、质量和管理
为了大多数幼体的饲料需要,还是应当依赖于高质量的活饵料,包括藻类和丰年虫
表6.幼体一级健康评估概要
| 标准 | 得分 | 阶段 | 观察 |
|
游泳活动 活泼(>95%) 中等(70-95%) 弱(在底层)(<70%) |
10 5 0 |
所有阶段 |
每开观察(2-4次) |
|
趋光性 积极的(>95%) 中等的(70-95%) 消极的(<70%) |
10 5 0 |
蚤状幼体 |
每天观察(2-4次) |
|
粪便条(cord索) 存在(90-100%) 中等(70-90%) 缺少(70%) |
10 5 0 |
蚤状幼体 |
每天观察(2-4次) |
|
发光 没有 存在(<10%) 大量(>10%) |
10 5 0 |
糠虾 |
培育池夜间观察 |
|
阶段同步性 高(80-100%) 中等(70-80%) 低(<70%) |
10 5 0 |
所有阶段 |
每天观察(2-4次) |
|
肠道内含物 充满(100%) 半满(50%) 空(<20%) |
10 5 0 |
糠虾 |
每天观察(2-4次) |
表7.幼体二级健康评估概要
| 指标 | 得分 | 阶段 | 观察 |
|
肝胰腺(脂肪胞) 高(>90%) 中等(70-90%) 低(<70%) |
10 5 0 |
所有阶段 |
每开观察(2-4次) |
|
肠道内含物 充满(>95%) 中等(70-95%) 空(<70%) |
10 5 0 |
所有阶段 |
每天观察(2-4次) |
|
坏疽 无(0%) 中等(<15%) 严重(>15%) |
10 5 0 |
所有阶段 |
每天观察(2-4次) |
|
畸形 无(0%) 中等(<10%) 严重(>10%) |
10 5 0 |
所有阶段 |
每天观察(2-4次)
|
|
体表寄生物 无(0%) 中等(<15%) 严重(>15%) |
10 5 0 |
所有阶段 |
每天观察(2-4次) |
|
“弹球”· 无 1-3 >3 |
10 5 0 |
所有阶段 |
每天观察(2-4次) |
|
杆状病毒 无(0%) 中等(<10%) 严重(>10%) |
10 5 0
|
糠虾 |
每天观察(2-4次)
|
表8.采用一级程序的虾苗质量评估概要
|
指 标 |
观 察 |
定性评价 |
得 分 |
|
脱皮 |
脱皮在水中 脱皮不粘附在虾苗 头部 |
||
|
<5% |
10 | ||
|
5-10% |
5 | ||
|
>10% |
0 | ||
|
游泳行为 |
虾苗游泳行为的活 跃程度 |
积极 |
10 |
|
中等 |
5 | ||
|
低 |
0 | ||
|
发光现象的直接观察 |
池子的夜间观察 |
<5% |
10 |
|
5-10% |
5 | ||
|
>10% |
0 | ||
|
成活率和临床诊断史 |
每个池子成活率的 估计 |
>70% 40-70% <40% |
10 5 0 |
|
指 标 |
观 察 |
定性评估 |
得 分 |
|
肌肉不透明 |
虾苗尾部肌肉不透明 |
||
|
<5% |
10 | ||
|
5-10% |
5 | ||
|
>10% |
0 | ||
|
畸形 |
头部和肢体的畸形 |
<5% |
10 |
|
5-10% |
5 | ||
|
>10% |
0 | ||
| 规格差异(CV) | 虾苗规格差异系数的计算 | <15% | 10 |
| 15-25% | 5 | ||
| >25% | 0 | ||
| 肠道内含物 | 消化道的充满程度 | 满 | 10 |
| 中等 | 5 | ||
| 空 | 0 | ||
| 肝胰腺颜色 | 肝胰腺相对着色 | 深 | 10 |
| 失色 | 5 | ||
| 透明 | 0 | ||
| 肝胰腺状况 | 油脂泡的相对数量 | 丰富 | 10 |
| 中等 | 5 | ||
| 无 | 0 | ||
| 体表寄生物污着 | 体表寄生物的污着程度 | <5% | 10 |
| 5-10% | 5 | ||
| >10% | 0 | ||
| 发黑 | 躯体或肢体的发黑 | <5% | 10 |
| 5-10% | 5 | ||
| >10% | 0 | ||
| 鳃发育 | 鳃片分枝程度 | 完全 | 10 |
| 中等 | 5 | ||
| 微小 | 0 | ||
| 肠道蠕动 | 肠道肌肉的运动 | 高 | 10 |
| 低 | 5 | ||
| 杆状病毒 | 每日(2-4次)观察糠虾 | 无(0%) | 10 |
| 中等(<10%) | 5 | ||
| 严重(>10%) | 0 | ||
| 肌肉对肠道比例 | 肌肉与肠道厚度之间比例的比较 | >3:1 | 10 |
| 1-3:1 | 5 | ||
| <1:1 | 0 | ||
| “弹球”(肝胰腺和肠道的脱落细胞) | 消化道内弹球的数目 | 无 | 10 |
| 1-3 | 5 | ||
| >3 | 0 | ||
| 应激检验 | 如果<75%,建议再次检验 | >75% | 10 |
|
分 析 |
观 察 |
定性决定 |
评 分 |
|
PCR |
|||
| WSSV/YHV |
阴性 |
10 | |
| IHHNV |
阴性 |
10 | |
| TSV |
阴性 |
10 |
应当使用一个归纳了三个级别的虾苗质量的表格和分数系统来决定虾苗的命运
正如幼体质量评估一样,应当制成三个级别质量的归纳表和使用的分数系统(根据情况使用全部或某些上述的指 标)。然后用这个表格来确定哪些池子内的虾苗被选择用于成虾养殖,哪些池子在选择前可能需要处理,而哪些池子内的虾苗应被丢弃。和前面一样,经验将指导孵化场经理对 所用指标的选择和打分的取舍点,在此分值以下的一批虾苗应当得到处理或被丢弃。
必须对放养特定一批虾苗的危险进行仔细的评估。
是否放养某一批虾在根本上是一种对危险的评估。无法提供固定的指导或标准,因为这通常源于经验。但是,以下指南可以用于减小在南美白对虾池塘养殖中遇到死亡率或生长不良的危险。在这种危险评估中,评价重要性的顺序为三级>二级>一级。
可以使用以下标准:
·虾苗必须通过三级评估。
○ 虾苗的YHV、IHHNV、WSSV和TSV的PCR或点渍法检测结果必须是阴性。
·在虾苗通过三级评估时,以下指南适用于二级评估:
○ 评分大于100分代表严重疾病问题的危险低,因此建议放养。
○ 评分在65-100分之间代表了具有严重疾病问题的中度危险。
○ 评分低于65分时显示了严重疾病问题的高度危险,因此建议不放养。
·如果虾苗通过了二级评估,以下指南适用于一级评估:
○ 评分超过30分显示具有严重疾病问题的危险低,因此是可以接 受的。
○ 评分在20-30分之间显示严重疾病的中度危险。
○ 评分低于20分显示严重疾病问题的高度危险,因此,建议不放养。
必须对对虾苗进行仔细和适当的包装,以运送到养成设施
应当遵守严格的生物安全性措施
应当建立全面和直至最近的文件资料和记录保存系统
1.Victoria Alday de Graindorge博士,TCP/RLA/0071地区协调官,INVE科技,Hoogveld 93,B-9200 Dendermonde,比利时,电子信箱:v.alday-sanz@inve.be
2.Marco Alvarez Galvez先生,海洋科学和海运工程学院,厄瓜多尔瓜亚基尔市09-01-5863信箱,电子信箱:marcoalvarezgalvez@hotmail.com
3.J.Richard Arthur博士,6798,Hillside Drive,Sparwood,B.C.加拿大V0B 2G3,电子信箱:rarthur@titanlink.com
4.Lorenzo Becerra先生,水生动物健康项目主任,国家水产养殖局长,Calle 2da Carrasquilla,Panamá,巴拿马,电子信箱:lbvpa@yahoo.com
5.Ronald Antonio Bernal Guardado博士,OIRSA萨尔瓦多代表,Organismo Internacional Regional
de Sanidad Agropecuaria(OIRSA),Final 1a.Av.Nte Y 13 C.Ote.,av,Manuel
Gallardo,Nueva SanSalvador,萨尔瓦多,C.A.,电子信箱:rbernal@telemovil.com
6.Melida Boada女士,Instituto Nacional de Investigaciones Agricolas delos Estados
Suere y Nueva Esparta(INIA-S/NE),Av.Carupano,sectorCaiguire,Cumana
6101,委内瑞拉,电子信箱:melidaboada@yahoo.es
7.Mathew Briggs博士,顾问,5/16 Fisherman Way,Vises Road,Rawai,phuket 83130,泰国,电子信箱:koygung101@yahoo.co.uk
8.Cesareo Cabrera先生,太平洋海水养殖,墨西哥,电子信箱:cesareo@maricultura.com.mx
9.Rodolfo Cadenas,水产养殖处-SARPA处长,Ministerio de la Producción y el Comercio.Servicio Autónomo de Pesca y Acuicultura,Torre este,piso 10,parque
central,Caracas,委内瑞拉,电子信箱:r_cadenas@hotmail.com
10. Francis Carolina Cardona Romero女士,Direcclón General de Pesca y
Acuicultura,Av
La粮农组织 Boulevard Miraflores,Tegucigalpa,洪都拉斯,电子信箱:jag_cr63@yahoo.com
11.Felix Carranza先生,水生动物健康国家协调员,Direccion de Salud Animal,Barreal Heredia Costa
Rica,Codigo Postal3 —3006 Cenada,哥斯达黎加,电子信箱:fcarranza@protecnet.go.cr
12.María Cristina Chavez Sanchez博士,高级科学家,Mazatlán Unit on Aquaculture and
Environmental Management of CIAD,A.C.Section:Aquaculture,Histopathology
Lab.,Av.Sábalo Cerrtos s/n,Apdo Postal 711.Mazatlán,CP. 821010,Sinaloa,墨西哥,电子信箱:marcric@victoria.ciad.mx
13.Elizabeth de la Cruz Suarez博土,海水养殖项目主任,Biology Faculty,Universidad Autonoma
de Nuevo Leon,Cd.Universitaria66450,San Nicolas de los Garzas,Nuevo
Leon,墨西哥,电子信箱:
lecruz@inp.semarnap.gob.mx
14. Roger Doyle教授,遗传计算有限公司,1030 Beaufort Av.Halifax,Nova scotia, 力拿大B3H3Y1,电子信箱:rdoyle@genecomp.com
15.Jorge Erraez先生,隔离检疫处处长,INP,09-01-15131信箱,Guayaquil,厄瓜多尔,电子信箱:jerraez@yahoo.es
16.Flor Delia Estrada Navarrete女士,研究员,Laboratorio de Sanidad Acuicola,Instituto
Nacional de Pesca,Sabalo Cerritos s/n,Col.Estero El Yugo,Mazatlam,Sinaloa,墨西哥,电子邮箱:flor@ola.icmyl.unam.mx
17.Daniel Fegan先生,对虾专家,BIOTEC,泰国,Apt.1D,Prestige Tower B,168/25 Sukhumvit
23,Klongtoey,Bangkok 10110,泰国,电子邮箱:dfegan@usa.net
18.Leonardo Galli先生,研究和发展执行经理,国家养虾公司,沙特阿拉伯,电子邮箱:gallimat@hotmail.com
19.Christian Graf先生,Consultor en maduracion y programas de reproductores,Cdla
Entrerios,Guayaquil,厄瓜多尔,电子邮箱:
barandualab@yahoo.com
20.Lachlan Harris博士,Seaquest S.A.经理,Via San Jose-Curia,Guayaquil,厄瓜多尔,电子邮箱:sqharrys@telconet.net
21.Allan Heres先生,兽医/微生物局,117 E.Lowell St.room 108, Tucson,Arizona,85721美国,电子邮箱:aheres@u.arizona.edu
22.Fernando Jimenez博士,水生动物健康主管,CONAPESCA-SENAICA SAGARPA,Sta.Barbara 2212
Cal.R.Florlda Monterrey
N.L.,México C.p.64810,México D.F,墨西哥,电子邮箱:fhjimenez@hotmail.com
23.Eitel Krauss V先生,生产经理,Aqualab S.A Aqualab S.A Aqualab S.A,Av.9 deoctubre,1911.Ed. Finansur P-7. Guayaquil,墨西哥
24.Anabel Leyva Rojo女士,Super Shrimp S.A.de C.V.,AV.CamaronSabalo No.310,Loc.25 y
26 C.P. 82110,Zona Dorada,Mazatlan,Sinaloa,墨西哥,电子邮箱:anabel.rojo@usa.net
25.Luis Arturo Lopez Paredes先生,渔业和水产养殖专家,Unidad de Manejo de la Pesca y
Acuicultura(UNIPESCA),Km22 Carretera.Pacífico Barcenas Villa Nueva;Edificio de
la Ceiba,3er nivel,Guatemala,危地马拉,电子邮箱:unipesca@c.net.gt
26.Gustavo Maranges先生,主管,GEDECAM,5ta avenida a 246 Barlovento,Santa
Fé,Playa,Ciudad de la Havana,古巴
27.Leonardo Mariduena先生,主管,Camara Nacional de Acuacultura,Av.Francisco de
Orellana Centro Empresarial las Camaras,3°Piso,Guayaguil,厄瓜多尔,电子邮箱:lmariduena@can-ecuador.com
28.Enrique Mateo Salas先生,科学顾问,秘鲁海洋研究所(IMARPE),Esquina de Gamarra y Gral.Valle-Chucuito,Callao,秘鲁,电子邮箱:ecmateos@infonegocio.net.pe
29.Ana Bertha Montero Rocha女士,墨西哥项目协调官,Instituto Nacional de la
Pesca(INP),Secretaria de Agricultura,Ganaderia,Desarrollo Rural,Pesca y
Alimentacion(SAGARPA),Pitágoras 1320,Sta Cruz Atoyac,C.P.03310.México D.F.,墨西哥,电子邮箱: anabmont@servidor.unam.mx
30.Leobardo Montoya Rodriguez先生,研究员,Centro de Investigacion Alimentacion y
Desarrollo(CIAD),Unidad Mazatlán en Aculcultura y Manejo Ambiental del
CIAD,A.C,Av.Sábalo-Cerritos s/n.Apdopostal 711,CP.
82010,Mazatlan,Sinaloa,墨西哥,电子邮箱:
montoya@victoria.ciad.mx
31.Milton Moreno先生,国家水产养殖主管,Ministerio de Desarrollo Agropecuario,Apdo Postal
5390 zona 5,Panama,巴拿马,电子邮箱:
kristin@cerco.net
32.Eugenio Enrique Obando Acosta先生,主席,Acualarvas Paraguana C.A.‘Acualpaca’,Calle
Tabana—Puerta Maraven,Punto Fijo Edo.Falcón,委内瑞拉,电子邮箱:acualpaca@unete.com.ve
33.Alvaro Otarola Fallas先生,水产养殖部主任,Instituto Costarricense de Pesca y
Acuacultura(INCOPESCA),Guapiles,Estacion los Diamantes,Guapils,哥斯达黎加,电子邮箱:otarosan@racsa.co.cr
34.Teodosio Pacheco先生,质量控制项目主管,Centro Regional de Investigaciones Pesqueras
Unidad Mazatlán(CRIP),Calzada Sábalo-Cerritos S/N,Colonia estero El
Yugo,Mazatlán, Sinaloa,C.P:82010,墨西哥,电子邮箱:tpachecq@red2000.com.mx
35.Grissel Perez女士,对虾残留控制项目,国家渔业和水产养殖研究所(NAPESCA),Venezuela,Caracas,委内瑞拉,电子邮箱:
qualitech@etheron.net
36.Melba B.Reantaso博士,水生动物研究病理学家,牛津合作实验室,马里兰自然资源局,904 S.Morris Street,Oxford MD
21654,美国,电子邮箱:MReantaso@dnr.state.md.us
37.Andrea Reneau女士,鱼类健康机构,伯利兹农业健康局,中央研究实验室,食物安全局,P.O.Box 181,St.Joseph Street,Belize City,伯利兹,电子邮箱:foodsafety@btl.net
38.Ruben Roman 先生, 对虾虾苗养殖实验室主任,CENAIM,Km30.5via perimetral,la Prosperina,Guayaqul,厄瓜多尔,电子邮箱:
rroman@cenaim.espol.edu.ecu
39.Lucia Saavedra Cuadra女士,ADPESCA/MIFIC,Costado Este hotel
lntercotinental,Metrocentro,尼加拉瓜,电子邮箱:
liscni26@yahoo.com
40.Lorena Schwarz Gilabert女士,经理,Centro de Servicios para la Aculcuitura(CSA),Km30.5
via perimetral,la Prosperina,Guayaquil,厄瓜多尔,电子邮箱:lschwarz@espol.edu.ec
41.Raquel Silviera Coffigny女士,水生动物健康部主任,Centro de Investigaciones,古巴,电子邮箱:raquel@cip.fishnavy.inf.cu
42. Rohana P. Subasinghe博士,(咨询会技术秘书处)高级官员,内陆水资源和水产养殖部,渔业局,联合国粮农组织,Viale delle
Terme di Caracalla,00100 Rome,意大利,电子邮箱:Rohana.
subasinghe@fao.org
43.Cleber Tailor Melo Carneiro先生,动物实验室协调官,Departamento de Defesa
Animal,Secretaria de Defesa Agropecuaria de Ministerio de Agricuiultura,Pecuaria
y Abastecimento,Ministerio de Agricultura,Pecuaria y Abastecimento,Esplanada dos
Ministerios Bloco D,Anexo/Ala A sala 317,Brasilia—Distrito Federal,CEP:
70.043.900,巴西,电子邮箱:clebertm@agrilcultura.gov.br
44. Zobeyda Valencia de Toledo女士,渔业和水产养殖发展中心(CENDEPESCA),Final 1 avy Nte 13
Cote,Av. Manuel Gallardo,Nueva San Salvador,萨尔瓦多C.A.电子邮箱:zvalencia@mag.gob.sv
45. Consuelo Vasquez Diaz女士,捕捞和水产养殖国家研究所(INPA),Apartado Aereo 33146,Bogota D.C.,哥伦比亚,电子邮箱:
consuvasquez@hotmail.com
[2] 或次氯酸钙
[3] 氯的存在通过黄颜色显示出来 [4] 也可以使用盐度变化。 [5] 详情见41页 [6] 过去,盐酸指以3:1混合的盐酸和硝酸,但是现在指34-37%的盐酸。 [7] 在使用福尔马林时,避免使用容器底部的白色沉淀物(甲醛),因为它是毒性很强的物质。 [8] 过去,盐酸指以3∶1混合的HCI和HNO3,但现在指34-37%的HCl。